發(fā)布時(shí)間： 2020-04-13 點(diǎn)擊次數： 1473次
內切酶一般從微生物中獲取，限制性核酸內切酶的作用實(shí)際就是限制酶降解外源DNA，維護宿主遺傳穩定的保護機制。自身DNA沒(méi)有被分解的原因是通過(guò)自身DNA甲基化，甲基化是常見(jiàn)的修飾作用，可使腺嘌呤A和胞嘧啶C甲基化而受到保護，即讓它們在甲基轉移酶的作用下，與甲基發(fā)生共價(jià)結合。通過(guò)甲基化作用達到識別自身遺傳物質(zhì)和外來(lái)遺傳物質(zhì)的目的。
限制性核酸內切酶識別序列的結構情況：
根據限制酶的結構，輔因子的需求切位與作用方式，可將限制酶分為三種類(lèi)型，分別是第①型（Type I）、第②型（TypeⅡ）及第③型（TypeⅢ）。
Type I：
同時(shí)具有修飾及識別切割的作用；另有識別DNA上特定堿基序列的能力，通常其切割位距離識別位可達數千個(gè)堿基之遠。
TypeⅡ：
?、蝾?lèi)中的限制性?xún)惹忻冈诜肿涌寺≈械玫搅藦V泛應用，它們是重組DNA的基礎。
只具有識別切割的作用，修飾作用由其他酶進(jìn)行。所識別的位置多為短的回文序列；所剪切的堿基序列通常即為所識別的序列。是遺傳工程上，實(shí)用性較高的限制酶種類(lèi)。
?、蝾?lèi)酶切割位點(diǎn)在識別序列中，有的在對稱(chēng)軸處切割，產(chǎn)生平末端的DNA片段；有的切割位點(diǎn)在對稱(chēng)軸一側，產(chǎn)生帶有單鏈突出末端的DNA片段稱(chēng)粘性末端，如EcoRⅠ切割識別序列后產(chǎn)生兩個(gè)互補的粘性末端。
TypeⅢ：
與一型限制酶類(lèi)似，同時(shí)具有修飾及識別切割的作用?？勺R別短的不對稱(chēng)序列，切割位與識別序列約距24-26個(gè)堿基對。
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